福岡県農業総合試験場研究報告23 (2004) pp 63 - 67
キクにおける外来遺伝子発現に有効なプロモーター
村上英子＊・平島敬太・池上秀利・中原隆夫・市川裕章１）
キクにおいて外来遺伝子の不活化を回避し，導入遺伝子の発現率を向上させるために，キクに感染するAgrobacterium tumefaciensより単離された新規プロモーター（pMAS201，pMAS102）の機能を，従来プロモーター（CaMV35S，El2Ω，NCR）と比較検討した。
A.tumefaciens接種21日後のキク葉切片におけるGUS遺伝子の一過的な発現率は，新規プロモーター・pMAS201，pMAS102ではそれぞれ11.4％，13.6％であり，従来プロモーターの2.7〜5.3％と比較して 2倍以上高率であった。PCRによりGUS遺伝子導入が確認された再生個体においても，新規プロモーターは従来プロモーターに比べて，GUS活性を示す形質転換体の獲得数が多く，かつGUS活性も高かった。これらのことから，新規プロモーターはキクにおける導入遺伝子の発現に有効なことが明らかとなった。
［キーワード：キク，形質転換，Agrobacterium tumefaciens，プロモーター，GUS遺伝子］
Efficient promoter for expression of transgenes in Chrysanthemum. MURAKAMI Hideko, Keita HIRASHIMA, Hidetoshi IKEGAMI, Takao NAKAHARA and Hiroaki ICHIKAWA (Fukuoka Agric. Res. Cent., Chikushino, Fukuoka 818-8549, Japan) Bull. Fukuoka Agric. Res. Cent., 23: 63 - 67 (2004)
In developing transgenic chrysanthemum, a transgene can be subject to inactivation by gene silencing. The performances of the promoter is an important factor in stability of expression of transgene. Mas promoter (pMAS102, pMAS201) was cloned from a Agrobacterium tumefaciens infected with the chrysanthemum. Expression of the GUS gene driven by pMAS102, pMAS201, 35S, El2Ω, NCR was assayed by two technical methods. Histochemically assay showed that the trangent GUS activity was higher than that of the 35S, El2Ω, NCR promoters in segments 21 days after infection. Three months after infection, insertion of MAS promoter of the expression cassette for the GUS gene increased transformant yields and the GUS activity was higher than that of the 35S, El2Ω, NCR promoters. MAS promoter enhanced the integration or expression of the transgene, or both. These results indicated the expression of foreign genes in Chrysanthemum in development of an efficient stable transformation system.
[Key words: Chrysanthemum, transformation, Agrobacterium tumefaciens, promoter, GUS gene]
＊連絡責任者（バイテク部 現病害虫部） １）（独）農業生物資源研究所 新生物資源創出研究グループ
