福岡県農業総合試験場研究報告14（1995） pp 159 - 162
抗体利用による病原糸状菌の簡易検出法の開発
第２報 Fusarium solani のモノクローナル抗体の作出
草野成夫・平島敬太・下村克己
病原糸状菌の簡易検出を目的として，Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ 菌糸破砕液を抗原としたモノクローナル抗体（Ｍａｂ）を作出した。得られたＭａｂを間接酵素結合抗体法（間接ＥＬＩＳＡ）で検定したところ，ポリクローナル抗体（Ｐａｂ）と比較して感度が２〜４倍向上し，Ｆｕｓａｒｉｕｍ 及び Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ
属菌以外の他属菌株に対する交差反応が低下し，特異性が高くなった。抗原に対する特異性は，アイソタイプＩｇＧのＭａｂがＩｇＭのＭａｂより高かった。また，Ｄｏｔ Ｉｍｍｕｎｏｂｉｎｄｉｎｇ Ａｓｓａｙ（ＤｌＢＡ）では間接ＥＬＩＳＡよりも感度が劣る傾向にあった。罹病組織からのＥＬＩＳＡによるＦｕｓａｒｉｕｍ
属菌の検出については，作出したＭａｂのうち３Ｇ１のみが，超音波処理したトマト罹病組織の磨砕抽出液からの検出に有効であった。
［キーワード：モノクローナル抗体，Fusarium solani，間接ELISA, DIBA，特異性］
Simple and Rapid Detection of Pathogenic Fungi Using Antibodies (2) Production of Monoclonal Antibody against Fusarium solani. KUSANO Nario, Keita HIRASHIMA and Katsumi SHIMOMURA. (Fukuoka Agric. Res, Cent. , Chikushino, Fukuoka 818, Japan) Bull. Fukuoka Agic. Res. Cent. 14 : 159-162 (1995)
Monoclonal antibodies (Mab) for the detection of Fusarium were produced by fusing spleen cells of mice immunized by mycelia suspension of Fusarium solani with myeloma cells. We obtained 2 to 5 times higher sensitivity in the detection of Fusarium by indirect ELISA using Mab rather than polyclonal antibody (Pab). The specificity of Mab for other genera except the genus Fusarium and Gibberella was higher than that of Pab. In the isotype of immuno globulin produced from Mab, immuno globulin G's specificity was slightly higher than immuno globulin M. The sensitivity of indirect ELISA was higher than Dot Immunobinding Assay (DIBA) in detecting fungi. Using only the 3Gl of Mab in indirect ELISA, it was also possible to detect Fusalium from the ultrasonic extraction of the fungal infected tomato plants.
[Key words : Monoclonal antibody, Fusarium solani, Indirect ELISA, DIBA, Specificity]
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